疱疹病毒通过抑制组蛋白H1.2的表达来阻止宿主细胞的凋亡

【摘要】凋亡是多细胞生物体单个细胞在受到重要的多种外界刺激后经历的系统性自我更新毁灭的一个过程。凋亡是基因调控的一个程序性事件,在发育过程中当细胞变的多余时用于删除多余的细胞,或者是作为应对辐射损害、致癌基因导致的畸形生长以及病毒感染突发事件的一个反应。在病毒感染的细胞中,引起宿主细胞早期的凋亡会很严重地限制病毒的产生,减少或消除病毒后代在宿主细胞中的传播,而疱疹病毒潜伏和裂解感染都能引起宿主细胞凋亡。为了保证潜伏期病毒基因组DNA存活以及疱疹病毒完成裂解复制周期,病毒都有自己的机制策略来阻止凋亡的即将发生和发生。组蛋白H1.2作为连接组蛋白一个变体,在凋亡信息由细胞核到细胞质的传导中起着重要作用。为了验证疱疹病毒是否通过调节H1.2而影响细胞凋亡,我们用qRT-PCR以及western-blot等方法在HSV-1和HCMV感染后的细胞中提取RNA和蛋白,发现疱疹病毒感染导致H1.2的RNA和蛋白水平下降。为了研究其作用机理,我们对HSV-1感染的BJ细胞进行了RNAPolⅡ的ChIP-seq分析,发现HSV-1感染BJ细胞后能有效地降低有转录活性的RNAPolymeraseⅡ在组蛋白H1.2基因上的结合,而其它组蛋白基因不受影响。同时这些结果表明疱疹病毒在转录水平上抑制组蛋白H1.2表达来阻止宿主细胞凋亡。H1.2必须从细胞核释放到细胞质结合线粒体进而发挥激活凋亡的作用。为了验证疱疹病毒是否调节这一过程,我们首先用一种引起DNA双链断裂发生凋亡的化学药物Etoposide处理细胞,发现H1.2从细胞核中释放出来,随后我们用免疫荧光实验观察病毒感染之后组蛋白H1.2定位变化。组蛋白H1.2在病毒感染之后仍然位于核内,这也暗示着HSV-1可能阻断组蛋白H1-2由细胞核向细胞质释放的过程。由于病毒干预细胞凋亡过程有利于病毒完成复制或潜伏,病毒因子很有可能有参与这一过程。在本实验中我们通过转染病毒的一些抗凋亡蛋白来寻找调控组蛋白H1.2的蛋白因子,通过qRT-PCR以及western-blot等实验我们找到了影响H1-2表达的病毒蛋白因子：ICP4、ICP22、ICP27和ICP34.5。最重要的实验是构建组蛋白调控区的报告载体,会在以后通过双荧光素酶检测系统来寻找病毒调控组蛋白H1.2基因表达的机制。
【作者】高海霞；
【导师】周巨民；
【作者基本信息】安徽大学，细胞生物学，2014，硕士
【关键词】组蛋白H1.2；疱疹病毒；凋亡；抗凋亡；

【参考文献】
[1]喻小燕.从“灵魂戏剧”看中西文化的差异[D].海南大学,比较文学与世界文学,2014,硕士.
[2]连峰,韩崇昭,刘伟峰,元向辉.基于SMC-PHDF的部分可分辨的群目标跟踪算法[J].自动化学报,2010,05:731-741.
[3]王晶.H培训公司基于收益管理理论的定价策略研究[D].北京交通大学,工商管理（专业学位）,2013,硕士.
[4]赵慧玲.ITU-TIP项目计划[J].电信网技术.2000(04)
[5]杨晓梅.透过《红字》看霍桑矛盾的女性观[D].安徽大学,英语语言文学,2014,硕士.
[6]万富奎.公共政策视角下工业化对环境影响研究[D].贵州财经大学,行政管理,2013,硕士.
[7]徐永豪.耐氟康唑白念珠菌ERG11基因突变筛查及鉴定芯片的研制[D].山东大学,2008.
[8]陈绍宽,李思悦,李雪,洪婧,赖瑾璇,蔡培.地铁车站内乘客疏散时间计算方法研究[J].交通运输系统工程与信息,2008,04:101-107.
[9]薛万东.胜利油田水资源综合利用工程规划研究[D].大连理工大学,建筑与土木工程,2003,硕士.
[10]叶庆波.量子Grover算法的改进及其在Ad Hoc网络路由选择中的应用[D].南京邮电大学,信号与信息处理,2013,硕士.
[11]江涛.农业措施对褐飞虱发生的影响及其机理[D].扬州大学,农业昆虫与害虫防治,2011,硕士.
[12]赵高伟.猪轮状病毒DN30209株的驯化培养[D].东北农业大学,兽医（专业学位）,2013,硕士.
[13]李祖文.微型扑翼飞行器的气动特性研究[D].南昌航空大学,航空宇航推进理论与工程,2013,硕士.
[14]程晨.基于智能机器人的自动剥离贴合设备的设计与研究[D].厦门大学,机械工程,2014,硕士.
[15]田妥.凝胶因子DMDBS在相变材料中的应用[D].天津大学,化学工程,2013,硕士.
[16]孙晨.基于子孔径分解的极化SAR图像分类方法研究[D].首都师范大学,地图学与地理信息系统,2014,硕士.
[17]杨兰.芳香羧酸调控的叠氮铜系配合物的结构与磁性[D].西北大学,材料化学,2014,硕士.
[18]王晶.核电安全端异种金属焊接接头拘束相关的J-R阻力曲线[D].华东理工大学,化工过程机械,2014,硕士.
[19]侯瑞雪.TP304H奥氏体不锈钢析出动力学研究[D].兰州理工大学,材料加工工程,2013,硕士.
[20]刘素涛.河北师范大学农村体育教育硕士现状调查研究[D].河北师范大学,学科教学,2014,硕士.
[21]边平政.基于指纹识别的身份认证系统终端的研究与设计[D].内蒙古大学,信号与信息处理,2014,硕士.
[22]刘秦.岳阳市观光农业营销策略研究[D].湖南农业大学,农村与区域发展,2012,硕士.
[23]范艳群.葡萄糖醛酸标准物质的研究[D].厦门大学,微生物学,2014,硕士.
[24]肖雯晖.中药痛经巴布剂治疗痛经的实验研究[D].浙江中医学院,中医妇科学,2003,硕士.
[25]高毅,申瑞民,杨帆,韩鹏.基于开放E-Learning平台的学生行为分析中心[J].计算机工程,2004,15:86-88.
[26]王海龙.大鼠寡霉素敏感相关蛋白（OSCP）基因在大肠杆菌中的克隆和表达[D].山西医科大学,病原生物学,2003,硕士.
[27]王翔.地方政府干预与银行业发展[D].浙江工商大学,金融学,2013,硕士.
[28]陈锐.新安江上游生态系统服务综合评估及管理应用研究[D].合肥工业大学,环境工程（专业学位）,2014,硕士.
[29]刘扬,付中华,唐玲.基于Windows平台的双通道回声抵消系统[J].计算机与现代化,2014,04:199.
[30]张承才.大理地区农村儿童食品卫生状况调查研究[D].大理学院,流行病与卫生统计学,2013,硕士.
[31]刘逸轩.尼尔·波兹曼媒介思想研究[D].山西师范大学,文艺学,2014,硕士.
[32]姚丰华.肠炎沙门菌溶血素共调节蛋白hcp基因及其致病性相关研究[D].扬州大学,基础兽医学,2014,博士.
[33]秦体红.量子Vernam加密算法和仲裁量子签名方案的研究[D].西南交通大学,应用数学,2013,硕士.
[34]王军.九网旅游电子商务平台的设计与开发[D].电子科技大学,软件工程（专业学位）,2012,硕士.
[35]夏凌云.危机信息传播中媒体舆论缓释效应研究[D].湖南师范大学,公共管理（专业学位）,2013,硕士.
[36]毛江平.车载云台摄像机的车牌识别系统研究[D].浙江大学,2014.
[37]王鸿.华夏银行长沙分行个人业务营销策略研究[D].湖南大学,工商管理,2014,硕士.
[38]罗莘.我国粮食安全的法律保障研究[D].西南交通大学,经济法学,2013,硕士.
[39]李永思.职场小说中的生存焦虑和人性异化[D].杭州师范大学,文艺学,2013,硕士.
[40]杨会荣.广西南宁香火龙文化研究[D].广西民族大学,民族传统体育学,2013,硕士.
[41]白思达.世界税制改革趋势及完善我国税制的研究[D].吉林财经大学,财政学,2014,硕士.
[42]程韬.表面改性碳纤维增强Fe_3Si基复合材料的研究[D].兰州理工大学,有色金属冶金,2014,硕士.
[43]贾嵘,王小宇,张丽,罗兴锜.基于EMD和AR模型的水轮机尾水管动态特征信息提取[J].电力系统自动化,2006,22:77-80.
[44]何莎莎.ZnO薄膜的低温溶液法制备及在光电器件中应用[D].浙江大学,材料科学与工程,2013,硕士.
[45]付兴发.磷钾肥和有机肥对马铃薯品质和产量影响的研究[D].四川农业大学,作物栽培学与耕作学,2012,硕士.
[46]何佼阳.《王子的长夜》第一章、第二章翻译报告[D].四川外国语大学,翻译（专业学位）,2014,硕士.
[47]丁新平.磁悬浮列车悬浮控制系统研究[D].沈阳工业大学,电力电子与电力传动,2004,硕士.
[48]廖军玲.让物理教学名至实归[D].首都师范大学,教育,2013,硕士.
[49]王岩.国际会议注册系统开发[D].吉林大学,软件工程,2013,硕士.
[50]程子龙.面向传染病传播的人工交通系统建模关键技术研究[D].国防科学技术大学,控制科学与工程,2012,硕士.